تراریزش گیاه گندم با استفاده از ژن fld به روش تفنگ ژنی

تنش­های غیرزیستی از جمله خشکی و شوری اولین عامل کاهش محصول در دنیا بوده و در اغلب محصولات مهم زراعی باعث کاهش شدید تولید محصول می شود. استفاده از روش­های مهندسی ژنتیک یکی از گزینه­های موجود جهت افزایش تحمل گیاهان به تنش­های غیرزیستی می باشد. در این تحقیق به منظور تولید گیاه گندم تراریخته متحمل به تنش های غیرزیستی، از روش تفنگ ­ژنی و وکتو رp6u - ubi - fvt1 استفاده شد. این وکتور حاوی ژن نشانگر باکتریایی استرپتومایسین و نشانگر گیاهی هیگرومایسین و ژن fld (فلاودوکسین) با منشاء سیانو باکتری می­باشد. فلاودوکسین نقشی مشابه فردوکسین ایفا کرده و قادر است با جلوگیری از وقوع اغتشاشات در چرخه انتقال الکترون و ممانعت از تشکیل گونه های فعال اکسیژن، آسایش گیاه را فراهم کند. بدین منظور از کالوس­های جنین زای ارقام بهار، لاین a ، پیشتاز، 83 n - و ارقام پاییزه زرین و s-87 به عنوان بافت هدف برای تراریزش استفاده شد. نتایج نشان داد ریز نمونه کالوس جنین زا رقم بهار با 51/6% شاخه زایی و 35/3% ریشه زایی بیشترین باززایی را در مقایسه با سایر ارقام دارند. بیشترین درصد شاخه زایی، ریشه زایی مربوط به رقم بهار و کمترین آن مربوط به رقم زرین و s - 87 بود. در این تحقیق 36 بار بمباران با استفاده از تفنگ ژنی انجام شد و تعداد شش گیاه رقم بهار و یک گیاه رقم لاین a تولید شد. آنالیز pcr روی یک گیاه رقم لاین a و شش گیاه رقم بهار انجام شد. نتایج آزمایش وجود حداقل یک نسخه از ژن هدف را در ژنوم گندم یک گیاه رقم لاین a تائید کرد. بیشترین درصد تراریزش مربوط به رقم لاین a بود که این مقدار برابر با 007/0 بود در نهایت آزمون لکه گذاری تائید بیشتر تلفیق ژن را در گندم های تراریخته تائید کرد.